제 2 단원 기술 세포학
제 10 장 비산부인과적 세포학적 검사물
비산부인과적 세포학적 검사물은 산부인과 세포학적 검사와 달리 검사물의 도말은 검사
실에서 이루어지며 도말 표본 이외에도 세포 군집절편 (cell block section) 이 진단에 이용
된다.
가) 검사물의 채취 및 도말 표본의 제작
비산부인과적 검사물은 종류가 다양하지만 채취된 검사물은 공통적으로 도말후 고정되기
까지 신선하게 보존되고 유지되어야, 염색이 양호해지고 적합한 검경이 이루어진다.
통상 검사물은 다음 4 가지로 크게 분류될 수 있는데 종류별로 검사물의 보존, 검사의
지체 시간을 예상하여 최대한 검사물의 신선함을 유지하여야 한다.
(1) 점액성 검사물
객담을 비롯한 호흡기계 검사물 등은 세포들이 점액 내에 섞여있는 상태가 되어 12-24
시간 동안 냉장고에 보관이 가능하다.
(2) 단백질이 많이 함유된 검사물
늑막액, 복수액 및 심낭액과 같은 체액은 단백질의 영양소 작용으로 24-48 시간 냉장고
에 보관이 가능하다.
(3) 점액이나 단백질의 함량이 적은 검사물
뇨와 뇌척수액은 세포를 파괴할 수 있는 효소를 가지고 있어 냉장고에 보관를 하더라도
세균 증식은 억제할 수 있으나 세포 파괴를 보호하지는 못한다, 일반적으로 1-2 시간 냉장
고에 보관이 가능하다.
(4) 수소 이온 농도 (pH) 가 낮은 검사물
위 (stomach ) 에서 얻어진 검사물은 산에 의해 세포들이 파괴되므로 수분 내에 도말 에
서 고정까지 처리되어야 한다.
a. 호흡기 검사물 (respiratory specimen)
(1) 객담
객담 검사를 위해서 검사물을 채취하기 전에 반듯이 양치질을 하게 해서 구강 내의 음식
물 찌꺼기가 오염되는 것을 방지한다. 이는 검경 시야를 더럽힐 뿐 아니라 특이한 식물 세
포가 악성 세포로 혼동되는 경우도 있기 때문이다.
객담은 많은 점액 속에 세포가 존재하는 검사물이다. 점액은 세포를 잘 보존하고 도말시
슬라이드에 세포의 접착력을 증가시킨다. 그러나 객담은 인두, 후두, 구강을 통과하는 동안
혼합된 타액에 의하여 세포들은 쉽게 소화되어 진단적 다양성의 소실을 초래한다. 점액의
양이 적고 타액이 많이 섞일수록 변성은 더욱 심해지고 빨라진다. 따라서 객담은 입구가
넓고 뚜껑이 있는 용기를 사용하고 객담 채취 즉시 검사실로 이송하여야 하며 검사실에서
는 접수 즉시 도말 하고 고정액에 넣어야 타액의 소화에 의한 변성을 방지할 수 있다.
불가피하게 검사가 늦어질 경우 반듯이 4o C 의 내장고 내에서 보관할 수 있으나 24 시
간을 넘어서는 안된다. 만약 24 시간이 넘을 것 같으면 객담과 동량의 50% ethanol 을 혼
합하여 전고정 (prefixed) 하고 냉장고에 보관한다. 50% ethanol 에서 전고정된 객담은 도
말시 슬라이드에 쉽게 부착되지 않으므로 미리 슬라이드에 egg albumin 혹은 gelatin 등의
접착제를 발라 사용한다.
완전 객담 연속검사 (complete sputum series)
임상에서 폐장의 병변이 의심스러울 때 완전 객담 연속검사를 실시하여 병적 세포의 발
견률을 높인다. 완전 객담 검사란 3 일 동안 매일 아침 기상 후에 첫 객담을 연속적으로
채취하여 세포학적 검사 (그림 12-11) 를 실시하는 방법이다. 객담은 24 시간 모두 모아서
검사할 수 없는데 이는 타액에 의해 세포들이 소화되어 변성되기 때문이다. 완전 객담 연
속 검사는 일회 객담 검사에 비해 기관지 암종의 발견률이 45% 에서 90% 로 증가시키는
연구 결과에서 보듯이 매우 유용하고 비교적 간단한 기관지암 발견 검사법이다
(방 법)
(1) 매일 아침 기상후 양치질을 한 후에 입구가 넓은 객담 용기에 폐포로 부터 나오는 객
담을 환자 스스로 받게 한다. 객담이 잘 나오지 않으면 기상 후에 가습기를 틀어 5-10
분간 심호흡을 실시한 후 받는다.
(2) 채취된 객담은 즉시 의뢰서와 함께 검사실로 보낸다.
(3) 검사실에 도착된 객담은 접수하여 일련 번호를 부여하고 즉시 Petri dish 에 얇게 편다.
이때 Petri dish 는 검은색 위에 올려놓으면 객담이 잘 보인다.
(4) 면봉의 나무 부분이나 forcep 과 가위를 사용하여 다음 부위 순으로 작게 선택 절취해
슬라이드 위에 올려놓고 다른 슬라이드를 이용하여 겹쳐서 얇게 도말 한다.
(a) 조직 파편 - 불투명하고 변색된 고형 물질로 관찰됨
(b) 오래된 혈액 부위 - 흑적색
(c) 농성 부위 - 갈색
(d) 신선 혈액 부위 - 선홍색
(e) 대식세포 부위 - 검게 관찰되는 객담 부위로 폐포에서 유래된 식세포 그룹
(5) 슬라이드 한 장에 한 부위씩 도말 하는데 여러 장일수록 병변 발견률은 높아진다 (보
통 4 장).
(6) 도말된 슬라이드는 즉시 고정액에 담가 고정한다 (그림 12-11).
(7) 도말 후에 남은 객담은 세포 군집절편에 사용한다.
(그림 12-11) : 객담 도말
기관지경 검사후 객담 검사
기관지경 검사 후에는 기관지 점막이 검사 기구나 솔, 검사 용액에 의해 자극을 받아 진
단적인 탈락 세포의 수가 많아 다른 검사법에 비해 병변의 발견률이 높다. 특히 기관지경
검사에 의해 채취된 검사 물보다도 양성률이 높아 반듯이 시도해야 한다.
(방 법)
(1) 기관지경 검사후 기구를 기관지에서 제거한 후로부터 1-2 시간 동안 환자에게 깊은
기침을 하게 하여 객담 용기에 객담을 받게 한다.
(2) 채취된 검사물은 즉시 검사실로 이송한다.
(3) 그 다음 날도 계속 3 일간 완전 객담 검사를 실시한다면 보통시 완전 객담 검사 보다
효율성이 높아진다.
(4) 이송된 검사물은 상기 방법에서처럼 도말 후에 즉시 고정한다.
(5) 도말 후에 남은 객담은 세포 군집절편에 사용한다.
폐쇄성 폐 질환 환자의 객담 검사
기관지의 폐쇄로 병적 세포가 객담으로 탈락되기 어렵고, 심한 염증은 세포의 변성을 초
래하여 진단이 어렵게 된다. 따라서 이런 환자는 항생제, 거담제, 기관지 확장제를 5 일간
치료하여 기관지 폐쇄와 염증을 감소시키면서 객담 배출을 시도해야 하고 세포의 변성을
막아야 한다.
(방 법)
(1) 치료 3 일부터 상기의 완전 객담 연속 검사를 실시한다.
(2) 각각의 객담은 채취 즉시 검사실로 이송하여 상기 방법으로 도말한후 즉시 고정한다.
(3) 도말후 남은 객담은 세포 군집절편에 사용한다.
Saccomanno 객담 검사
객담 내에 다량의 점액 성분을 제거하고 세포 성분만을 농축하여 처리할 수 있는 방법으
로 병적 세포의 수가 적은 검사물 일지라도 진단적 세포의 발견률을 높이게 된다. 뿐만 아
니라 일단 처리된 검사물은 오랫동안 방치해도 세포의 형태학적 변성 없이 수개월 보존할
수 있다(그림 12-12).
(방 법)
(1) 150 ml flask 나 시험관에 객담을 넣고 Saccomanno 용액 (2% carbowax 용액 :
carbowax 2 ml 를 50% ethanol 98 ml에 혼합) 을 객담 양에 따라 50-100 ml 을
첨가한다.
(2) flask 을 혼합기나 vortex mixer 기에서 고속으로 10 초간 혼합한다.
(3) 2개의 원심 침전용 50 ml 원추 시험관에 분주하고 2500 rpm에서 10 분간 원심 침전한
다.
(4) 상층 액을 버리고 한 시험관의 침전물을 잘 혼합하여 슬라이드에 한두 방울 올려놓고
다른 슬라이드로 가볍게 포개면서 도말 하여 즉시 고정한다,
(5) 다른 시험관의 침전물은 세포 군집절편에 사용한다.
(그림 12-12) : Saccomanno 객담 검사법
(2) 기관지경 검사물
기관지경으로 병소를 관찰하면서 얻어지는 세포학적 검사물로 기관지 세척 (washing)
액, 기관지 흡인 (aspiration) 액, 기관지 솔질 (brushing) 액의 3가지 검사물이 있다. 특히
기관지경 검사물은 기관지 상피의 이상을 보는 경우가 많으므로 조심스럽게 도말 하여 섬
모나 종말판 (terminal plate) 의 인위적인 소실을 막아야 한다.
기관지 세척
생리 식염수로 짧은 시간 내에 세척하므로 세포의 형태학적 변성은 없으나 검사물 채취
후 오래 방치하면 세균 번식에 의해 변형이 초래된다. 따라서 검사물 채취 즉시 검사실로
이송하여야 하며 검사실에서는 즉시 도말 하여 만들어 고정하여야 한다.
(방 법)
(1) 기관지경 검사에서 병변이 애매하거나 숨어 있을 가능성이 있는 부위의 기관지를 생리
식염수로 세척하여 흡인한다. 여기서 조직 생검을 실시했다면 생검 기구
(biopsy forcep) 를 생리 식염수에 세척하여 기관지 세척액과 동일하게 처리한다.
(2) 검사물은 즉시 검사실로 이송한다.
(3) 검사실에 접수된 검사물은 즉시 처리하고 검사가 지체될 경우는 냉장고에 보관하며 24
시간을 초과할 경우 50% ethanol 을 검사물에 동량을 섞어 냉장고에 보관한다.
(4) 흡인된 세척액은 2개의 원심 침전용 원추형 시험관에 분주하고 2500 rpm에서 10 분간
원심 침전하여 상층 액은 버린다.
(5) 한 시험관의 침전물을 슬라이드 위에 1-2 방울 올려놓고 다른 슬라이드로 부드럽게
겹쳐서 얇게 도말한후 즉시 고정한다. 양이 적을 경우는 그대로 슬라이드에 얇게 도말
한 후 즉시 고정한다. 50% ethanol로 전 처치된 검사물은 도말시 접착제를 슬라이드에
미리 발라 세포의 슬라이드 부착력을 증가시킨다.
(6) 기관지 종류별 혹은 채취 부위를 구분할 필요가 있을 경우는 각 슬라이드에 표시한다.
(7) 다른 시험관의 침전물은 세포 군집절편에 사용한다.
기관지 흡인
(방 법)
(1) 기관지경 검사시 의심 부위에서 관찰되는 모든 분비물을 흡인한다.
(2) 흡인된 검사물은 기관지 세척액과 같이 처치하고 도말 하여 즉시 고정한다.
(3) 도말후 남은 검사물은 세포 군집절편에 사용한다.
기관지 솔질
기관지경으로 관찰하면서 병변이 의심되는 부위를 솔질하여 검사물을 채취한다. 기관지
상피 세포들은 쉽게 형태가 변형될 수 있기 때문이다. 특히 섬모와 종말판의 인위적 소실
과 세포질의 파괴가 쉽게 발생한다.
(방 법)
(1) 기관지경 검사시 병변이 의심되는 부위에 솔을 부드럽게 사용하여 찰과 한다.
(2) 관을 통해 체외로 솔을 빼내고 즉시 유리 슬라이드 위에 얇고 가볍게 도말 한다. 이때
슬라이드에 강하게 도말 하면 세포들의 형태학적 변형을 초래한다.
